PBMC pöytäkirjan

Kylmäsäilytetyt veren valkosoluja (PBMC) ovat usein yksilöiden alkuperä tutkimusta, johon sisältyy immunoterapioiden ja vastauksia rokotteita. Vaikka joidenkin protokollien rajoittuvat eristäminen ja jäädyttäminen vaiheissa, toiset ovat sulatus menettelyjä. Eristäminen Menettely ja jäädyttäminen Menettelyn

kaupallinen yhdiste edistää erottaminen on sijoitettu kuhunkin 50 ml sentrifugiputkeen ja putkia sentrifugoidaan kolmekymmentä sekuntia. Korkit veriputkien suihkutetaan alkoholia ennen avaamista, sitten antikoagulantti-käsitelty kokoveri siirretään sitten pipetillä sentrifugiputkiin. Plasmassa kerros veri imetään pipetillä.
Freezing

soluja edellisessä vaiheessa on sitten sentrifugoitiin puskuroidulla suolaliuoksella kolme kertaa. Jälkeen solujen määrä, yksilöt sentrifugoidaan sitten keskeyttää jäädyttämistä välineellä. Näytteet pakkasessa keskipitkällä seuraavan kerran jaettu cryovials yhdessä ml määriä. Pulloja yön ylitse

-70 º C pakastimessa ja muutti pitkäaikaiseen varastointiin nestemäisessä typessä seuraavana päivänä.
Safe Ikiroudan

Cryovials siirretään nestemäisen typen 37 ° C: n vesihauteessa ja näytteen annetaan sulaa yhdestä kahteen minuuttia. Lämmin kulkuvälineissä lisätään jokaiseen pulloon. Laimennettua solususpensiota sentrifugoidaan seitsemän minuuttia. Lukumäärä ja solujen elävyys tarkastetaan, jos solut tarvitsevat keskittymisvaikeudet, näytteet sentrifugoidaan seitsemän minuuttia. Näyte laimennetaan työliuoksen ja levätä kaksitoista-kahdeksantoista tuntia ennen alkua tutkimusta tietynlaista menettelyä.

Referenssit
Biomed Central: pöytäkirja eristäminen , kylmäsäilytys ja sulatus PBMCs
verkosto Haiman Organ luovuttajat Diabetes: eristäminen veren valkosoluja (PBMC)
Resurssit
Los Almos National Labs: ainetestiin PBMC
Tutkijoiden Solutions: eristäminen Lymfosyyttejä kokoverestä.