Protokollat ​​Hoechst Staining

Hoechst tahrat ovat fluoresoivia väriaineita käytetään merkintöjä DNA ja RNA fluoresenssimikroskopiaa ja virtaussytometrian tekniikoita. Hoechst 33258 ja Hoechst 33342 ovat eniten käytetty näistä tahroja. Niillä on kyky sitoutua DNA-molekyylejä, jolloin ytimet ja mitokondriot näkyvät fluoresoivan ultraviolettivalossa. Protokollat ​​Hoechst värjäystä ovat yleinen käytäntö bioteknologian ja genetiikan laboratorioissa, ja myös soluvärjäystä tekniikoita käyttäen sekä Hoechst 33258 ja Hoechst 33342. Hoechst 33342 HSC värjäystä ja Stem Cell Puhdistusmenettelyohje

Tätä protokollaa käytetään värjäämään soluja hiiriin luuytimestä. Teknikot valmistaa luuytimen näyte HBSS + suolaliuosta, HEPES-puskuria ja vasikan sikiön seerumia. Ne spin ratkaisu ja lisää esilämmitettyyn DMEM. Hoechst tahra lisätään sitten. Liuos laitetaan 98,6 celsiusta vesihauteessa tasan 90 minuuttia, raportoi immunologian osaston yliopiston Pittsburgh. DNA-segmentit näkyvät fluoresoivia sytometrillä.
Hoechst 33342 DNA Staining

Tänä protokollaa, teknikot keskeytettiin Hoechst 33342 tahra tislattua vettä, lisätään 2 prosenttia vasikan sikiön seerumia solu-näyte, pitäen pH arvossa 7,2 avulla puskuriliuosta. Soluja inkuboidaan 98,6 asteessa tunnin, ja heti analysoitiin laite nimeltään sytometrillä.

Stained DNA on sitten näkyvissä ja loisteputkien mukaan Michiganin yliopiston Health System.


DNA tunnistus-DNA-sitovan fluorokromi Hoechst 33258

protokollia käytetään laite kutsutaan spektrofotometri analysoida DNA ja RNA segmenttejä. Teknikot käyttävät Hoechst 33258 työliuoksen ja kateenkorvasta DNA-näytteitä. He myös erotettu ratkaisu käyttäen DNA-näyte ja kemiallisia kutsutaan etidiumbromidin. Myöhemmin he verrata soluvärjäystä tulokset sekä median, spektrofotometrilla mukaan Current pöytäkirjat vuonna Cytometry.